實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南:關(guān)鍵步驟與注意事項(xiàng)
本文檔由 忘了天空的顏色 分享于2023-11-07 17:02
實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)指的是在PCR進(jìn)行的同時(shí),對(duì)其過(guò)程進(jìn)行監(jiān)測(cè)的能力(即實(shí)時(shí))。因此,數(shù)據(jù)可在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,而非PCR結(jié)束之后,進(jìn)行收集。這為基于PCR的DNA和RNA定量方法帶來(lái)了革命性的變革。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qPCR)中,反應(yīng)以循環(huán)中檢測(cè)到目標(biāo)擴(kuò)增的時(shí)間點(diǎn)為特征,而非在一定循環(huán)數(shù)后目標(biāo)分子累計(jì)的擴(kuò)增量。目標(biāo)核酸的起始拷貝數(shù)越高,則會(huì)越快觀察到熒光的顯著增加。相反,終點(diǎn)法檢測(cè)..
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